أنابيب E. coli مع تعبير GFP — شرح وصور محاكية
واجهة تفاعلية بسيطة تعرض كيف تبدو رواسب (pellets) خلايا E. coli المعبرّة عن GFP تحت ضوء فوق بنفسجي.
أنبوب 1 — رواسب صغيرة
بعد طرد 1 مل من المزروع وطرد الوسط، يتبقى كمية قليلة من الخلايا متركزة في قاع الأنبوب (pellet صغير). عند تعرضها للضوء فوق البنفسجي تظهر فلورة خضراء زاهية بسبب GFP.
أنبوب 2 — رواسب متوسطة
رواسب أعلى حجماً تظهر فلورة أقوى لأن عدد الخلايا المعبرة عن GFP أكبر. الإضاءة الزاهية تحت UV مؤشر على نجاح التعبير الوراثي.
أنبوب 3 — رواسب كبيرة
عينة مكتظة بالخلايا (مثل طرد حجم مزروع أكبر أو زمن نمو أطول). قد تكون مفيدة لخطوات استخراج البروتين أو الفحص المجهري.
شرح مختصر للإجراء (باللغة العربية)
- استنبات خلايا E. coli المعدلة وراثياً لتحمل جين GFP في وسط مغذي مناسب حتى تصل إلى الكثافة المطلوبة.
- سحب 1 مل من المزروع ووضعه في أنبوب طرد مركزي (microtube).
- طرد العينة بالطرد المركزي (~5–10 دقائق، 3000–5000 × g حسب البروتوكول) حتى تتجمع الخلايا في القاع.
- التخلص من الوسط العلوي (supernatant) بحذر، يبقى الخلايا في شكل "pellet" في القاع.
- توجيه مصدر ضوء فوق بنفسجي (UV) أو ضوء أزرق قوي على الأنبوب في غرفة مظلمة لملاحظة الفلورة الخضراء الناتجة عن GFP.
ملاحظات أمان: يجب تنفيذ كل خطوات العمل مع الكائنات المعدلة وراثياً ضمن قواعد السلامة البيولوجية المختبرية المناسبة، وارتداء معدات الحماية الشخصية، وتجنب التعرض المطول لمصدر UV.